Microscope confocal à balayage laser

Microscope optique permettant l’imagerie en 3D d’échantillons biologiques ou de matériaux en utilisant la lumière réfléchie ou la fluorescence. Le modèle à disposition est équipé des raies laser 405 nm, 458nm, 488 nm, 514nm, 561 nm et 633 nm et permet d’acquérir des images entre 405 nm et 700nm avec différents détecteurs dont un détecteur spectral haute sensibilité (GaASP). Possibilité d’acquérir des spectres d’émission et de réaliser de la déconvolution spectrale. Equipé d’objectifs longue distance 10X/0.3, 20X/0.8, 50X/0.95 et à immersion 40X/1.2 et 63X/1.4. Présence d’une chambre d’incubation permettant de moduler la température et la concentration en CO2 pour réaliser de l’imagerie in vivo. Dispositif équipé de portoirs spécifiques permettant la réalisation de microscopie corrélative Confocal/MEB sur la plateforme.

Applications d’imagerie multiples : imagerie à l’échelle cellulaire de tissus végétaux et fongiques, interactions plantes/champignons/bactéries, biofilms bactériens, localisation protéines, interactions protéines-protéines…

Méthodes utilisées principalement : marquage avec des fluorochromes (DAPI, iodure de propidium, WGA, TOPRO…), hybridation in situ par fluorescence (FISH), marquage de protéines ou de microorganismes/plantes (GFP, mCherry, YFP…), immunomarquage

 Exemples de publications pour lesquelles le LSM780 a été utilisé :

- Schneider-Maunoury L., Deveau A., Moreno M., Todesco F., Belmondo S., Murat C., Courty PE, Jakalski M., Selosse MA (2019) Two ectomycorrhizal truffles, Tuber melanosporum and Tuber aestivum, endophytically colonize roots of non-ectomycorrhizal plants in natural environments. New Phytologist. doi:10.1111/nph.1632

- C. Miquel Guennoc,C. Rose, J. Labbé,  A. Deveau (2018). Bacterial biofilm formation on the hyphae of ectomycorrhizal fungi: a widespread ability under controls? FEMS Microbiology Ecology. https://doi.org/10.1093/femsec/fiy093

- F. Zhang, G. E. Anasontzis, A. Labourel, C. Champion, M. Haon, M. Kemppainen, C. Commun, A. Deveau, A. Pardo, C. Veneault-Fourrey, A. Kohler, M-N. Rosso, B. Henrissat, J-G. Berrin, F. Martin (2018). The ectomycorrhizal basidiomycetes Laccaria bicolor releases a secreted ß-1,4 endoglucanase that plays a key role in symbiosis development. New Phytologist.doi:101111/nph.15113.

Contact

Aurélie Deveau (aurelie.deveau@inrae.fr), Frédéric Guinet (frederic.guinet@univ-lorraine.fr), Christophe Rose (christophe.rose@inrae.fr)

Pour aller plus loin / Documents à consulter

Choosing the right microscopy technique : https://www.youtube.com/watch?v=01v2kR8dlnQ

Fluorescence microscopy : https://www.youtube.com/watch?v=AhzhOzgYoqw

Confocal Microscopy : https://www.youtube.com/watch?v=YRQsjPAx9UU